ن : mahdi shirkavand
مقدمه و تئوری:
آزمایش بیوره : مکانیسم اندازه گیری پروتئین به روش بیوره تشکیل کمپلکس بین یونهای مس دو ظرفیتی(Cu 2+) و پیوندهای پپتیدی است و برای تشکیل کمپلکس نیاز به حداقل دو پیوند پپتیدی است تا کمپلکس تشکیل گردد که کمپلکس تشکیل شده رنگ آبی دارد . جذب رنگ آبی تولید شده را در طول موج 540 نانومتر خوانش می کنند و از آنجایی که جذب با غلظت ارتباط مستقیم دارد طبق قانون بییر – لامبرت با رسم یک منحنی استاندارد مقادیر پروتئین مجهول در نمونه قابل اندازه گیری است .
هر چه تعداد پیوند پپتیدی بیشتر باشد شدت و غلظت رنگ بنفش زیادتر خواهد بودعلت تولید رنگ قرار گرفتن مس در بین دو پیوند پپتیدی است .
آزمایش اثر حلال های آلی : حلال های آلی با تغییر نیروهای هیدروفوب و هیدروژنی، منجر به اختلال در ساختمان های دوم و سوم پروتئین می شود.
آزمایش اثر فلزات سنگین : در PH حدود 7، بیشتر پروتئین ها دارای بار منفی هستند.بنابراین با یون هایفلزات سنگین که دارای بار مثبت هستند، ترکیب شده و نمک های نامحلول اینفلزات را تشکیل می دهند که منجر به رسوب پروتئین می گردد.
آزمایش اثر اسیدها بر پروتئین ها : اسیدهابا تغییر PH و تغییر بار در گروه های آمین و کربوکسیل منجر به شکستنپیوندهای یونی و هیدروژنی در پروتئین ها شده و رسوب میدهند.
وسایل و مواد مورد نیاز : لوله آزمایش – قطره چکان – محلول پروتئینی – معرف بیوره – محلول فلزات سنگین – اسید نیتریک – استن
روش کار :
آزمایش بیوره :
2 میلی لیتر محلول پروتئینی را برمی داریم.
3 میلی لیتر معرف بیوره به آن اضافه می کنیم.
رنگ آبی متمایل به بنفش دلیل وجود پروتئین است.
آزمایش اثر حلال های آلی :
1 تا 2 میلی لیتر محلول پروتئینی بر می داریم.
قطره قطره استن به آن اضافه می کنیم.
رسوب سفید دلیل وجود پروتئین است.
آزمایش اثر فلزات سنگین :
2 میلی لیتر محلول پروتئینی برمی داریم.
قطره قطره محلول فلزات سنگین (مس ) به آن اضافه می کنیم.
رسوب سفید دلیل وجود پروتئین است.
آزمایش اثر اسیدها بر پروتئین ها :
1 تا 2 میلی لیتر محلول پروتئینی بر می داریم.
قطره قطره اسید نیتریک به آن اضافه می کنیم.
رسوب سفید دلیل وجود پروتئین است.
نظرات شما عزیزان:
:: موضوعات مرتبط: گزارش کار آزمایشگاه، ،
:: برچسب‌ها: گزارشکار آزمایشگاه,
خبرنامه وب سایت:
آمار
وب سایت: